熒光分光光度計的操作流程遵循標準化、系統(tǒng)化的步驟，確保測量數(shù)據(jù)的準確性與儀器的長期穩(wěn)定運行。以下是基于主流廠商手冊與實驗室規(guī)范整合的完整操作流程：

一、開機準備?

?電源順序?：

接通穩(wěn)壓電源，確保電壓穩(wěn)定；

打開計算機與打印機電源；

啟動主機電源開關（POWER），儀器進入自檢狀態(tài)，右上方指示燈常亮。

?預熱要求?：

儀器需預熱 ?15–30分鐘?，若進行定量分析，建議預熱 ?≥30分鐘?，以確保光源與檢測器熱平衡。

? 預熱期間應?打開樣品室蓋?，切斷光路，避免光電倍增管（PMT）長時間受光疲勞。

二、樣品制備與放置?

?比色皿選擇?：

必須使用?四面透光石英比色皿?，普通玻璃或塑料會吸收紫外光，導致信號失真。

?操作規(guī)范?：

拿取時僅捏住?上角非透光面?，避免指紋污染透光面；

液體體積控制在?2/3容量?，防止溢出污染光路；

外壁用?擦鏡紙?輕拭干凈，確保無水漬或污漬；

放入樣品室時，?透光面朝向光路?，方向保持一致（如橫線朝外）。

?參比溶液?：

使用與樣品相同溶劑作為空白對照，置于樣品架槽，用于儀器自動調零（T=100%）。

三、測量模式選擇?

根據(jù)實驗目的選擇以下模式之一：

?激發(fā)光譜掃描?：固定發(fā)射波長，掃描激發(fā)波長，獲取λ_ex值。

?發(fā)射光譜掃描?：固定激發(fā)波長，掃描發(fā)射波長，獲取λ_em值。

?定量分析?：

配制系列標準溶液（濃度梯度）；

在固定λ_ex與λ_em下測定熒光強度；

繪制標準曲線（強度–濃度），外推未知樣品濃度。

?三維掃描（3D Scan）?：同時掃描激發(fā)與發(fā)射波長，生成熒光地形圖，用于復雜體系分析。

建議每次測量前進行?背景扣除?，消除溶劑或雜質熒光干擾。

?四、關機與維護?

?關機順序?：

取出比色皿，立即用去離子水沖洗，再用乙醇清洗，倒置晾干；

退出軟件系統(tǒng)，?關閉氙燈?（非直接斷電）；

?保持主機通電10分鐘以上?，使燈室風扇持續(xù)散熱；

關閉主機電源、穩(wěn)壓電源、計算機與打印機。

?長期維護?：

若儀器停用超過一周，建議每周開機預熱30分鐘，防潮防塵；

定期（每20天）進行?激發(fā)與發(fā)射波長校準?，確保波長準確性；

氙燈壽命約2500小時，更換后需重新校準光路。